在xn仪器推出之前,xe机型中的baso通道和nrbc通道是两个不同的通道,而在xn机型中,这两个通道被合并,称为wnr通道。
wnr通道原理:
wnr通道主要使用到两种试剂,分别为溶血素(lysercell wnr )和染液(fluorocell wnr)
溶血素的特点:
一、强酸性:由于嗜碱粒细胞内部环境成酸性,在酸性环境下,会在细胞膜周围形成稳定层,使细胞不容易破裂。
二、低渗透压:使除了嗜碱粒细胞外其他的白细胞发生皱缩,有核红细胞以裸核形式存在。
如图所示为wnr通道散点图,纵坐标为前向散射光,代表细胞大小,横坐标为侧向荧光,代表细胞核酸含量。
由于嗜碱粒细胞的形态在溶血素中保持不变,所以它的细胞体积最大,核酸含量最多,因此在wnr通道散点图中位于右上方,除了嗜碱粒细胞以外的白细胞在溶血素的作用下发生了皱缩所以细胞体积变小,核酸含量降低,因此位于嗜碱粒细胞的左下方,由于有核红细胞的胞浆和核仁都比白细胞少,在溶血素的作用下以裸核形式存在,所以位于散点图的左侧。
有核红细胞的临床意义:
正常成人外周血中均没有有核红细胞,出生一周之内的新生儿的外周血中可能少量存在,所以成年人外周血中如果观察到有核红细胞,均属于病理现象。
血片中有核红细胞检出率较高的疾病有:骨髓纤维化,溶血性贫血,急性红白血病,失血性贫血,骨髓增生异常综合征等。(参考无锡一院1998年1月至2003年12月实验结果)
当患者出现溶血性贫血,急性失血性贫血时,由于红细胞大量破坏丢失,使骨髓代偿性增生旺盛,加速释放有核红细胞进入血液循环,且比例较高。
病人手术后,外周血存在nrbc的患者死亡率高达21.1%,且含量越高,死亡率越高,而不存在者的死亡率仅为1.2%,并且外周血中存在nrbc的病人进行骨髓移植的预后较差,其移植死亡率与nrbc浓度成正比(当外周血nrbc达到0.2x109/l时,病人的死亡率为100%)
案例分享
一:nrbc对白细胞计数的干扰。
如图右侧diff散点图上淋巴细胞下方红色散点为有核红细胞,仪器给出了ip信息:nrpc?白细胞计数结果为7.22×103/μl
此时加做nrbc通道,结果如图所示,nrbc#:1.367.22×103/μl,nrbc%:24.9/100wbc,wbc&(经nrbc修正后的白细胞总数 ):5.44×103/μl,nrbc w(未经nrbc修正过的白细胞总数):6.80×103/μl
与xn仪器的比较
xn仪器的wdf通道淋巴细胞下方和wnr通道左侧的红色散点均为nrbc,仪器给出了存在有核红细胞的报警,并且直接给出了有核红细胞的计数结果,在service界面,可以看到tnc-n(未经nrbc修正过的白细胞总数)的计数结果。
二:难容红细胞对白细胞的干扰
如图baso散点图上方有胡须状白色散点,同时仪器给出难容红细胞报警,白细胞计数结果为8.20×103/μl,service界面diff通道白细胞结果为3.4×103/μl,与baso通道结果相差太大,所以仪器给出了error报警,推片镜检后,wbc镜下计数结果和diff通道结果较为接近,所以最后以diff通道wbc结果报告。
同一个标本放到xn仪器上检测的结果如下图,仪器并没有难容红细胞相关报警提示,wbc计数结果与xe机型diff通道相同,service界面中wnr通道白细胞计数为3.388×1012/l,wdf通道白细胞计数为3.382×1012/l,两个通道结果接近,比值为0.99.
综上:
wbc计数最常见干扰为有核红细胞,难容红细胞,乳糜颗粒。
xn仪器中,即使只做cbc,所有样本也可以自动报告有核红细胞计数,同时进行了白细胞计数和分类的修正,而在xe机型中,需要加做nrbc才可以进行白细胞的修正,增加了试剂成本。
而难容红细胞,脂质颗粒都没有核,荧光强度低,在xn中加入的荧光染液,使得上述干扰物不会对结果造成影响,所以xn机型删除了“rbc lyse resistance”报警。
此外,xn机型的试剂开发中做了调试,xe溶血素中只有阴离子表面活性剂,而wnr溶血素中还加入了阳离子表面活性剂,从而区分nrbc和wbc,并解决了脂肪滴的问题。